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技術(shù)支持

凱氏定氮儀使用前如何清洗

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凱氏定氮儀是利用凱氏定氮法對物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量進行測定的專用儀器。凱氏定氮儀按其配置分,可以分為全自動凱氏定氮儀和半自動定氮儀。其中全自動凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置。凱氏定氮儀操作時可以分為人工模式和自動模式,不同的實驗者,可以根據(jù)對實驗操作的熟練程度,自由選擇哪種方式。一般的,新手我們推薦使用自動模式,可以為你省去很多的步驟。目前,凱氏定氮儀已經(jīng)廣泛使用于測定乳核乳制品中蛋白質(zhì)的測定。

下面我們主要介紹下,我們在使用全自動凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)含量時,如何清洗定氮儀。

儀器安裝前,凱氏定氮儀各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈,所用橡皮管、塞須浸在10%NaOH溶液中,煮約10min,水洗、水煮10min,再水洗數(shù)次,然后安裝并固定在一只鐵架臺上。

儀器使用前,微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌,以除去管道內(nèi)可能殘留的氨,正在使用的儀器,每次測樣前,蒸氣洗滌5min即可。較長時間未使用的儀器,重復(fù)蒸氣洗滌,不得少于三次,并檢查儀器是否正常。仔細檢查各個連接處,保證不漏氣。這樣,一方面保證了儀器的清潔,另一方面,也同時對儀器進行了檢查,一些壞的零部件,可以及時被查出并替換。

儀器安裝完后,我們需具體對儀器的內(nèi)部進行清潔。首先在凱氏定氮儀蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水,加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果,并放入少許沸石(或毛細管等),以防爆沸。這個步驟有點類似于凱氏定氮法的消化前步驟,用相應(yīng)的試劑對其進行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室,但玻杯內(nèi)的水不要放光,塞上棒狀玻塞,保持水封,防止漏氣。這一步可直接驗證插管是否可以使用。蒸氣發(fā)生后,立即關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān),使蒸氣只能進入反應(yīng)室,導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)的水迅速沸騰,蒸出蒸氣由反應(yīng)室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻,在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發(fā)燙開始計時,連續(xù)蒸煮5min,然后移開煤氣燈。沖洗完畢,夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管,由于氣體冷卻壓力降低,反應(yīng)室內(nèi)廢液自動抽到反應(yīng)室外殼中,打開廢液排出口夾子放出廢液。整個清洗過程,到這里就結(jié)束了,經(jīng)過清洗這個過程,儀器內(nèi)部環(huán)境已經(jīng)符合我們測定蛋白質(zhì)含量的需求,另外,儀器的各部件也得到了檢驗,可以及時更換漏氣或者其他壞了的部分。根據(jù)以上步驟重復(fù)清洗23次,再在冷凝管下?lián)Q放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口完全浸沒在溶液中,蒸餾12min,觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色。如不變色,表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈。移去錐形瓶,再蒸餾12min,用蒸餾水沖洗冷凝器下口,關(guān)閉煤氣燈,儀器即可供測樣品使用。

這樣,凱氏定氮儀整個清洗過程就結(jié)束了。凱氏定氮儀在測定蛋白質(zhì)含量前,一般都需要經(jīng)過清洗,這樣對于測定結(jié)果,會更加精確。另外,也可以保證實驗室人員的安全,因為在清洗過程中,對儀器進行了檢查,排除了因為儀器的故障而造成了危險。

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